Notch信号通路阻断剂对人脐带间充质干细胞软骨分化的影响

• 作者: 吴颜晖 唐明乔 宇丽 张家文 符淑莹 罗二梅 陈丹纯
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脐带脐血干细胞 分化 人脐带间充质干细胞 软骨细胞 DAPT Notch信号通路 蛋白聚糖 Ⅱ型胶原蛋白 甲苯胺蓝染色 免疫荧光染色 qPCR 广东省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（23）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 3609-3615
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.23.001

摘要

背景：Notch 信号通路作为一条在细胞增殖和分化过程中起重要作用的信号通路，目前它在人脐带间充质干细胞在体外向软骨细胞诱导分化过程中的作用仍然未知。目的：首次探讨 Notch 信号通路特异性阻断剂2，4-二氨基-5-苯噻唑(DAPT)对人脐带间充质干细胞向软骨细胞诱导分化的影响。方法：从人脐带中分离获得间充质干细胞，体外向软骨细胞诱导分化。实验分4组：①无诱导组换成含体积分数5%胎牛血清和1%双抗的DMEM高糖培养基培养。②单纯诱导组换成终浓度为6.25 mg/L胰岛素、6.25 mg/L转铁蛋白、10μg/L转化生长因子β1、0.1μmol/L地塞米松、50 mg/L维生素C、体积分数5%胎牛血清和1%双抗的软骨诱导培养基培养。③二甲基亚砜组在软骨诱导培养基中加入终浓度为0.1%的二甲基亚砜培养。④2，4-二氨基-5-苯噻唑组在软骨诱导培养基中加入终浓度为5μmol/L的2，4-二氨基-5-苯噻唑(溶于二甲基亚砜)培养，二甲基亚砜终浓度为0.1%。结果与结论：诱导人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化后，细胞形态由长梭形变为多边形，且甲苯胺蓝染色和免疫荧光染色均呈现阳性；软骨诱导分化后Jag-1、PS-1、Notch-1、Hes-1的基因表达均明显下降(P<0.01)；添加2，4-二氨基-5-苯噻唑后，与单纯诱导组相比，人脐带间充质干细胞中Jag-1、PS-1、Hes-1(P<0.01)和Notch-1(P<0.05)的基因表达显著降低；蛋白聚糖和Ⅱ型胶原蛋白含量均降低(P<0.01)；蛋白聚糖的基因表达显著降低(P<0.01)，Ⅱ型胶原蛋白的基因表达也出现一定程度的下降。提示Notch信号存在于人脐带间充质干细胞中，诱导人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化后，这种信号强度迅速减弱；2，4-二氨基-5-苯噻唑可能通过Jag-1-Notch-1-Hes-1途径抑制人脐带间充质干细胞向软骨细胞分化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宇丽	暨南大学医学院生物化学系	28	135	8.0	10.0
2	吴颜晖	暨南大学医学院生物化学系	8	60	4.0	7.0
3	张家文	暨南大学医学院生物化学系	3	11	2.0	3.0
4	罗二梅	暨南大学医学院生物化学系	3	17	2.0	3.0
5	符淑莹	暨南大学医学院生物化学系	1	2	1.0	1.0
6	陈丹纯	暨南大学医学院生物化学系	1	2	1.0	1.0
7	唐明乔	暨南大学理工学院力学和土木工程系	3	19	2.0	3.0