多黏类芽孢杆菌JSa-9电转化方法的优化

• 作者: 别小妹 吕凤霞 邓阳 陆兆新 高玲
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 多黏类芽孢杆菌JSa-9 电转化 转化效率
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 89-94
• 页数: 6页
• 分类号: Q785
• 字数: 5933字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201411018

摘要

为建立多黏类芽孢杆菌JSa-9菌株的高效电击转化体系,本实验研究菌体培养时间、电场强度、电击缓冲液、质粒用量以及电击后复苏培养时间等因素对JSa-9菌株电转化效率的影响.结果表明:Paenibacillus polymyxa JSa-9培养至OD595nm为0.3时,电转化效率最高,为0.12×103 CFU/μg DNA;用0.5 mol/L甘露醇、0.5 mol/L山梨醇以及10％甘油的电击缓冲液洗涤细胞,在电场强度17.5 kV/cm、电阻200Ω,电容25 μF的电击条件下,加入1.0 μg/100 mL质粒DNA,复苏培养时间18h,电转化效率达到约为0.36×103 CFU/μg DNA;制备P.polymyxa JSa-9原生质体,在电场强度5.0 kV/cm的电击条件下,加入0.8μg/100 mL质粒DNA,电转化效率较感受态电转提高到约1.0×103 CFU/μg DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	别小妹	南京农业大学食品科技学院	134	1767	21.0	36.0
2	陆兆新	南京农业大学食品科技学院	253	4353	33.0	53.0
3	吕凤霞	南京农业大学食品科技学院	145	1968	21.0	38.0
4	邓阳	南京农业大学食品科技学院	4	27	2.0	4.0
5	高玲	南京农业大学食品科技学院	9	88	6.0	9.0