人结合珠蛋白cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达和鉴定

• 作者: 刘亮 唐晓波 孟琴 李淑珍 汤伟松
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢癌 人结合珠蛋白 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2014,（24）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4644-4647
• 分类号: Q93-33|Q75|Q78|R737.318
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2014.24.010

摘要

目的:克隆人结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)cDNA,并在大肠杆菌中表达和鉴定.方法:从Hela细胞中分离总RNA,采用RT-PCR方法获得人Hp cDNA,分别克隆至原核表达载体pET-32a和PGEX-4T-1,转化至大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE及Westem blot鉴定.结果:成功构建了高效原核表达质粒PET-32a-Hp和PGEX-4T1-Hp;Western印迹结果表明,经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达了分子量约30 kD和37 kD的目的蛋白;表达产物经Ni2+-NTA离子交换树脂纯化,纯度＞90％.结论:在E.coli成功表达和纯化了人Hp融合蛋白,为进一步开发人Hp诊断试剂打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐晓波	哈尔滨医科大学药学院	28	106	5.0	8.0
2	李淑珍	哈尔滨医科大学药学院	19	27	3.0	3.0
3	刘亮	哈尔滨医科大学药学院	13	24	4.0	4.0
4	孟琴	哈尔滨医科大学药学院	2	4	2.0	2.0
5	汤伟松	哈尔滨医科大学药学院	2	4	2.0	2.0