两种砷化物诱导胰岛细胞的凋亡

• 作者: 仲来福 姚晓峰 姜丽平 孙鲜策 杨光 王方芳 耿成燕 郑白璐
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 砷化物 大鼠胰岛β细胞 细胞凋亡 活性氧 P53 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 8286-8291
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 5609字
• 语种: 中文

摘要

背景：近年有流行病学调查显示砷暴露与糖尿病发病相关。<br>　　目的：实验从砷导致胰岛β细胞凋亡的机制入手，阐明砷化物相关糖尿病的致病机制。<br>　　方法：将砷酸氢二钠(Na2HAsO4·7H2O，iAs5+，50，100，200μmol/L)和二甲基胂酸钠(C2H6AsNaO2·3H2O， DMA5+，100，200，400μmol/L)分别作用于大鼠胰岛细胞株(INS-1细胞)24 h或48 h。通过MTT法检测砷化物对胰岛细胞的毒性作用。用Annexin V-FITC/PI和Hoechst 33258染色法检测两种砷化物致细胞凋亡情况。用2’，7’-二氢二氯荧光素染色检测细胞内活性氧的含量，用Western blot检测细胞内P53的蛋白含量变化。<br>　　结果与结论：砷酸氢二钠(>50μmol/L)、二甲基胂酸钠(>100μmol/L)均降低大鼠胰岛β细胞的细胞存活率(P<0.05，P <0.01)；砷酸氢二钠(50-200μmol/L)和二甲基胂酸钠(100-400μmol/L)作用于大鼠胰岛β细胞48 h后，细胞发生凋亡。砷酸氢二钠、二甲基胂酸钠暴露24 h引起大鼠胰岛β细胞内活性氧水平呈剂量依赖性升高(P <0.05，P <0.01)。经砷酸氢二钠染毒的胰岛β细胞的细胞核内P53蛋白表达增多(P <0.05，P <0.01)，而经二甲基胂酸钠染毒的大鼠胰岛β细胞的细胞核内P53蛋白表达差异无显著性意义。结果说明，两种砷化物砷酸氢二钠、二甲基胂酸钠均可引起胰岛β细胞凋亡，可能与砷所致活性氧水平增高有关。