Lentivirus载体对许旺细胞的转染效率

• 作者: 侯铁胜 周蔚 孔维清 张涛 徐建广 曾炳芳 连小峰
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 许旺细胞 Lentivirus病毒 病毒载体 感染复数 转染效率 细胞培养 脊髓损伤 绿色荧光蛋白 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 8301-8304
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 3864字
• 语种: 中文

摘要

背景：近年来研究较多的LV载体，因其强大的转染能力以及较高的转染效率等特点，在基因转染的实验中应用越来越广泛。<br>　　目的：进一步验证Lentivirus载体在体外对原代许旺细胞的转染效率。<br>　　方法：以Lentivirus三质粒系统构建病毒载体，在体外分别以MOI值为1，5，10，20，40对原代大鼠许旺细胞进行转染，转染后第1，3，5，7，9天在荧光显微镜下观察Lentivirus携带的荧光表达情况，并在显微镜的计数方格内计算细胞的转染情况。发出绿色荧光的为转染成功的许旺细胞，否则认为没有转染病毒载体的，从而算出转染效率。<br>　　结果与结论：在病毒转染3 d后，在各不同MOI值的培养孔中，均能观察到极少量的荧光反应，在第5天时，荧光数量较前明显增多。第7天时达到高峰，第9天的荧光数量与第7天变化不明显。从细胞转染效率来看，不同的MOI值明显不同，MOI值为1时的转染效率约为45%，MOI值为5时为80%，MOI值为10时为90%， MOI值为20时为78%，MOI值为40时转染效率为70%。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾炳芳		110	1493	20.0	34.0
2	侯铁胜		54	503	13.0	20.0
3	徐建广		17	270	9.0	16.0
4	孔维清		6	29	4.0	5.0
5	连小峰		2	0	0.0	0.0
6	周蔚		6	68	3.0	6.0
7	张涛		9	16	2.0	4.0