不同等电点沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白的双向电泳分析

• 作者: 卜登攀 李发弟 杨永新 陈静廷 马露
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛奶 乳清蛋白 等电沉淀 超速离心 提取方法 双向凝胶电泳图谱
• 年，卷（期）: 2014,（20）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 180-184
• 页数: 5页
• 分类号: S823
• 字数: 4721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201420036

摘要

为探索牛奶乳清蛋白提取的最适方法,以生鲜荷斯坦牛奶为对象,采用不同等电点(pH 4.6和pH 4.8)沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白样品,并对提取效果进行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱分析.依据凝胶图谱上蛋白斑点比较图谱质量,采用PDQuest 8.0凝胶图像分析软件进行凝胶图谱分析.结果显示:2种方法均能有效提取牛奶乳清蛋白,且获得的2-DE凝胶图谱背景清晰、蛋白点个体独立、无明显的拖尾现象,且重复性强,但都存在一定的酪蛋白残留.与超速离心法相比,pH 4.6沉淀法和pH 4.8沉淀法提取乳清蛋白的2-DE凝胶图谱可检测到较多的蛋白质斑点.pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备的2-DE凝胶图谱中蛋白点的表达丰度略高于pH 4.8沉淀法.研究表明:pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备2-DE凝胶图谱略优于pH 4.8沉淀法和超速离心法.但2种等电点沉淀法和超速离心法都可有效去除牛奶中的高丰度酪蛋白,提高低丰度蛋白的检出敏感性.