脂质体介导转染N2a细胞的优化方法

• 作者: 杨桂姣 王若楠 赵云鹤 陆利
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 脂质体 贴壁转染 悬浮转染 N2a细胞 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（29）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 4669-4674
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 5971字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.29.014

摘要

背景：阳离子脂质体介导的细胞转染具有结果可靠、可重复性强的特点，但面临一个共同的缺点，就是转染效率常较低。<br>　　目的：探讨阳离子脂质体转染N2a细胞(小鼠神经胶质瘤细胞)的优化方法。<br>　　方法：采用24孔培养板，1.5μL阳离子脂质体Lipofectamine?LTX介导，通过贴壁法和悬浮法，将500 ng带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组质粒pcDNA3-GFP转入N2a细胞，倒置荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白表达情况，并比较二者转染效率。采用悬浮转染法，将500 ng质粒DNA分别用1.0，1.5，2.0，2.5μL Lipofectamine?LTX进行转染，探讨最适脂质体和DNA比例。<br>　　结果与结论：1.5μL脂质体/500 ng DNA，悬浮法转染效率显著高于贴壁法转染效率(P<0.01)；1.0，1.5，2.0，2.5μL Lipofectamine?LTX对500 ng质粒DNA的转染效率分别为(76.60±3.85)%，(80.00±4.17)%，(88.00±5.89)%，(54.96±4.23)%，提示脂质体2.0μL与质粒DNA 500 ng的转染效率最高。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨桂姣	山西医科大学人体解剖学教研室	114	349	9.0	10.0
2	赵云鹤	山西医科大学人体解剖学教研室	31	135	7.0	10.0
3	陆利	山西医科大学人体解剖学教研室	38	155	7.0	10.0
4	王若楠	山西医科大学七年制临床医学系	6	8	2.0	2.0