HLA-A2小干扰RNA的设计及沉默效果检测

• 作者: 刘建生 裴丹 赵刚 郑德宇
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 人类白细胞抗原A2 RNA干扰 基因沉默 人胚肺成纤维细胞 辽宁省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（29）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建基础实验
• 页码范围: 4605-4610
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 6521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.29.003

摘要

背景：人类白细胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)是人的主要组织相容性复合物，在移植排斥反应中起关键作用。降低HLA的表达，可以延长移植物的存活时间。<br>　　目的：设计HLA-A2小干扰RNA，检测其对HLA-A2表达沉默的作用。<br>　　方法：设计4种HLA-A2 siRNA靶点序列构建其慢病毒表达体系，体外感染HLA-A过表达的293T细胞，观察4种靶点的敲减效率并筛选出有效靶点序列。体外培养人胚肺成纤维细胞，并用携带目的干扰序列的慢病毒感染人胚肺成纤维细胞，荧光显微镜下观察感染效率，应用 Western blot 检测在人胚肺成纤维细胞中对HLA-A2表达沉默的作用。<br>　　结果与结论：根据Genbank中HLA-A2的mRNA序列，设计合成了3个小干扰RNA，在体外能有效的沉默HLA-A2在293细胞中的表达，将基因序列亚克隆入干扰载体后感染人胚肺成纤维细胞，也能有效的沉默HLA-A2的表达，效率达80%左右。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑德宇	辽宁医学院解剖学教研室	41	120	6.0	8.0
2	刘建生	辽宁医学院解剖学教研室	13	16	2.0	3.0
3	裴丹	辽宁医学院解剖学教研室	10	58	4.0	7.0
4	赵刚	辽宁医学院解剖学教研室	5	6	2.0	2.0