一氧化氮合酶基因转染小鼠内皮祖细胞的实验研究

• 作者: 党胜春 冯舒 张建新 王平江 陈荣芳
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: 内皮祖细胞 内皮型一氧化氮合酶基因 一氧化氮 氧自由基
• 年，卷（期）: 2014,（22）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3464-3467
• 页数: 4页
• 字数: 3308字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨利用脂质体介导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因体外转染小鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPC)的可行性.方法 密度梯度离心法分离ICR小鼠骨髓来源单个核细胞培养制备小鼠EPC并鉴定;构建、扩增、提取并纯化pcDNA3.0/eNOS基因质粒;用EPC培养基配成2×105·mL-1细胞悬液,按0.6 mL/孔重新铺6孔板,待细胞生长至80％左右融合时,用脂质体LipofectamineTM 2000体外转染eNOS基因至EPC.转染48 h后,采用RT-PCR检测EPC中eNOS的表达,硝酸还原酶法检测EPC中一氧化氮(NO)的含量,荧光探针DCFH-DA活性氧检测氧自由基(ROS)的含量.结果 成功培养EPC,成功构建pcDNA3.0/eNOS基因载体.转染48 h后,EPC中eNOS表达量明增加(P＜0.01),NO含量明显升高(P＜0.01),ROS含量明显降低.结论 脂质体介导eNOS基因能够有效转染小鼠EPC,并能在EPC中有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	党胜春	江苏大学附属医院普外科	89	322	9.0	14.0
2	张建新	江苏大学附属医院普外科	90	386	11.0	13.0
3	冯舒	江苏大学附属医院普外科	10	23	3.0	4.0
4	王平江	江苏大学附属医院普外科	11	20	2.0	4.0
5	陈荣芳	江苏大学附属医院普外科	3	3	1.0	1.0