不同分离及纯化方法对人胰岛分离纯化的影响

• 作者: 黑洁
• 来源期刊: 中国社区医师
• 关键词: 胰岛 分离 纯化 移植
• 年，卷（期）: 2014,（36）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 11-12
• 页数: 2页
• 字数: 2347字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-614x.2014.36.3

摘要

目的：探讨胶原酶P、释放酶分离及不连续密度梯度和连续密度梯度纯化方法对胰岛产量、纯度及活动度的影响。方法：分别采用胰管内注射胶原酶P及释放酶水浴消化以及分别采用COBE2991连续密度梯度离心法和Ficoll不连续密度梯度离心法纯化。用DTZ染色计算胰岛细胞的纯度；用AO/PI染色计算胰岛细胞存活率；通过体外葡萄糖刺激胰岛素分泌试验判定胰岛细胞功能。结果：两组活度均在95%左右，两组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。应用Ficoll不连续密度梯度离心法可获得胰岛纯度(77.5±13.4)%，用胶原酶P组，释放酶组可分别获得(1829±517)和(3129±893)个胰岛/每克胰腺，两者差异有统计学意义(P＜0.05)。应用COBE2991连续密度梯度离心法可获得胰岛纯度(92.8±7.4)%，纯化后细胞形态完好，两者差异有统计学意义(P＜0.05)。体外葡萄糖刺激胰岛素分泌实验，高糖情况下(5.33±1.13)mIU/L，两者差异有统计学意义(P＜0.05)，低糖情况下胰岛素分泌量(2.63±0.67)mIU/L。结论：用COBE2991连续密度梯度离心法纯化胰岛较Ficoll400不连续密度梯度法纯化可获得纯度更高的胰岛细胞。采用胰管内释放酶灌注进行人胰岛分离优于胶原酶P。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黑洁		2	4	1.0	2.0