不同方法提取SD大鼠膝关节软骨组织的总RNA

• 作者: 何升华 孙志涛 林定坤 牛维
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 软骨组织构建 软骨 RNA提取 大鼠 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（51）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 软骨组织构建
• 页码范围: 8201-8205
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 6190字
• 语种: 中文

摘要

背景：目前文献报道的软骨RNA提取有多钟方法，国内文献报道多为经典Trizol法，在实验中发现该方法提取的RNA并不能满足后续实验的需要。<br>　　目的：探索不同方法提取SD大鼠软骨组织总RNA的区别。<br>　　方法：选取3月龄SD大鼠9只，分别采用Rneasy Lipid Tissue Kit、RNAout试剂盒和经典Trizol法对软骨组织进行总RNA提取，并通过RNA琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性，以探寻软骨总RNA最佳提取方案。<br>　　结果与结论：Trizol法提取的RNA A260/A280值为1.58，说明纯度不高；RNAout法提取的RNA，由于软骨含有大量的蛋白多糖和胶原，也不能满足后续实验的需要；RNeasy? Mini Kit法和肝(Trizol)法提取RNA的A260/A280值分别为2.00和1.98，说明提取的总RNA或核酸的纯度高。RNA的完整性电泳结果显示， RNeasy? Mini Kit法、RNAout法和肝(Trizol)法可见28 s、18 s及5 s条带，而Trizol法未见任何条带， RNAout法28 s和18 s条带不清楚。结果提示Rneasy Lipid Tissue Kit法获得的总RNA纯度高、完整性和稳定性好，并能成功反转录合成双链cDNA，而RNAout试剂盒和经典 Trizol法获得的总 RNA不能满足后续实验需要。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林定坤	广东省中医院骨三科	135	975	18.0	25.0
2	牛维	广东省中医院骨三科	15	46	3.0	6.0
3	何升华		30	166	8.0	12.0
4	孙志涛		17	108	6.0	10.0