MDA-7基因的腺病毒载体构建及对肺腺癌A549细胞凋亡的影响

• 作者: 张雅洁 李书华 王红艳 谢晓斌 龙捷
• 来源期刊: 现代医药卫生
• 关键词: 病毒复制 基因疗法 肿瘤/治疗 复制缺陷型腺病毒 AdMax包装系统
• 年，卷（期）: 2014,（13）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 1929-1932
• 页数: 4页
• 字数: 4055字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5519.2014.13.004

摘要

目的：构建一种由腺病毒AdMax包装系统表达目的基因---黑色素瘤分化相关基因鄄7（MDA鄄7）的复制缺陷型腺病毒，并初步探索其抗肿瘤活性。方法通过基因操作技术将目的基因（MDA鄄7）插入到5型腺病毒AdMax包装系统的E1A区域，构建复制缺陷型腺病毒Ad.hMDA鄄7鄄EGFP；同时构建对照病毒Ad.EGFP。病毒滴度计算按寇化法（Kar鄄ber法）进行腺病毒感染性滴度（TCID50）测定。应用免疫组化染色法检测MDA鄄7在感染2种病毒的肺腺癌 A549细胞中的表达状态；通过二苯甲亚胺鄄碘化丙啶（Hoechst33342鄄PI）双染色法及流式细胞仪检测2种病毒对肿瘤细胞杀伤的差异。结果成功构建携带目的基因的腺病毒载体，经聚合酶链反应（PCR）鉴定正确；MDA鄄7在感染Ad.hMDA鄄7鄄EGFP的肺腺癌A549细胞中表达，以相同感染复数（MOI）值感染Ad.EGFP时肺腺癌A549细胞中未检测到MDA鄄7表达；Ad.hMDA鄄7鄄EGFP对肿瘤细胞株杀伤能力明显高于Ad.EGFP。结论成功构建复制缺陷型腺病毒Ad.hMDA鄄7鄄EGFP，并证实MDA鄄7蛋白在肿瘤细胞中过表达，诱导肺腺癌A549细胞株发生凋亡。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李书华		13	27	3.0	4.0
2	谢晓斌		11	42	4.0	6.0
3	张雅洁		24	90	6.0	8.0
4	龙捷		10	34	4.0	4.0
5	王红艳		14	36	3.0	5.0