慢性腱病模型大鼠肌腱干细胞体外成脂和成肌腱的分化能力

• 作者: 徐宏亮 林禹丞 王宸 芮云峰 陈辉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 分化 肌腱干细胞 慢性腱病 髌腱 成脂分化 成肌腱分化 油红O染色 实时定量PCR 成脂性基因(C/EBPα PPARγ2) 肌腱特异性基因(Col1a1 Scx Tnmd以及Dcn) 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（45）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 7320-7326
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7166字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.45.019

摘要

背景：慢性腱病是一种常见的肌腱退行性病变，好发于运动员以及肌腱过度劳损的人群。由于慢性腱病的发病机制尚未阐明，临床上还缺乏有效的治疗手段。<br>　　目的：体外研究比较慢性腱病大鼠和正常大鼠来源肌腱干细胞成脂、成肌腱分化能力。<br>　　方法：从慢性腱病大鼠以及正常大鼠髌腱中分离培养原代肌腱干细胞，传代培养至第3代，体外观察细胞形态学变化。将两种来源肌腱干细胞(P3)单层培养至细胞融合，分为2组，成脂诱导组用成脂诱导培养基培养，对照组用基础培养基培养。成脂诱导分化21 d后，将两种来源肌腱干细胞的成脂诱导组和对照组分别行油红O染色定量分析。实时荧光定量PCR检测各组细胞成脂性基因C/EBPα和PPARγ2的mRNA的表达。将两种来源的肌腱干细胞体外单层培养至70%-80%融合时，行实时荧光定量PCR检测慢性腱病来源肌腱干细胞以及正常肌腱干细胞成肌腱相关基因Col1a1，Scx，Tnmd和Dcn的mRNA的表达。<br>　　结果与结论：肌腱干细胞体外培养至第3代时，正常肌腱来源的肌腱干细胞保持细长纺锤形的典型的干细胞形态，而慢性腱病来源的肌腱干细胞虽然形态发生改变，但仍保持纺锤形形态。肌腱干细胞(P3)体外成脂诱导分化21 d后，慢性腱病来源的肌腱干细胞胞体变大、变圆，可见大量油红O染色阳性的细胞，油红O染色阳性率显著高于正常大鼠(P=0.004)。实时荧光定量PCR结果显示，慢性腱病大鼠来源肌腱干细胞的成脂性基因(C/EBPα和PPARγ2)mRNA的表达均显著高于正常大鼠(P=0.004)，肌腱特异性基因Col1a1，Scx， Tnmd以及Dcn mRNA表达量均明显低于正常大鼠(P =0.009)。说明与正常大鼠来源的肌腱干细胞相比，慢性腱病来源的肌腱干细胞体外成肌腱分化的能力减弱，而成脂分化的能力增强，此结果为进一步揭示慢性腱病发病机制提供了细胞生物学依据。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宸	东南大学附属中大医院骨科	140	1003	16.0	22.0
5	陈辉	东南大学附属中大医院骨科	87	627	13.0	20.0
6	芮云峰	东南大学附属中大医院骨科	21	85	6.0	8.0
10	徐宏亮	东南大学附属中大医院无锡分院骨科	3	4	2.0	2.0
11	林禹丞	东南大学附属中大医院骨科	8	30	3.0	5.0