新生小鼠海马、嗅球及皮质神经干细胞的分离培养及鉴定

• 作者: 严贵忠 任海军 侯博儒 刘吉星 陈四化 马浚宁 高俊玮
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 培养 神经干细胞 神经球 海马 嗅球 皮质 CD133 巢蛋白 神经干细胞库 甘肃省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（45）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 7266-7272
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7739字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.45.010

摘要

背景：从体外分离培养出高纯度、生物学性能均一的神经干细胞，建立起一套完整的神经干细胞培养体系，是进行神经干细胞研究的基础。<br>　　目的：建立新生小鼠海马、嗅球、皮质组织神经干细胞的分离培养体系，并对其生物学特性进行分析。<br>　　方法：分离新生昆明小鼠海马、嗅球、皮质组织，采用机械分离和胰酶消化法提取原代神经干细胞。采用无血清培养技术、机械吹打和酶消化法进行传代培养神经干细胞。以体积分数为10%的胎牛血清诱导分化神经干细胞。对神经干细胞及其分化产物行CD133、巢蛋白、β-微管蛋白Ⅲ、胶质纤维酸性蛋白免疫荧光染色鉴定。<br>　　结果与结论：从新生小鼠海马、嗅球、皮质可提取出具有自我更新和多向分化能力的神经干细胞，经巢蛋白、CD133免疫荧光染色检测呈阳性；神经干细胞经胎牛血清诱导后可分化为β-微管蛋白Ⅲ、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞，并证实染色阳性细胞为神经元和星形胶质细胞。该实验建立了一套神经干细胞体外分离培养、纯化、鉴定、诱导分化方案，为后续神经干细胞研究的顺利进行奠定了实验基础。