SK-N-SH神经母细胞瘤干细胞培养及鉴定

• 作者: 南国新 宿玉玺 王忠良 蔡文全 覃佳强 谢艳 黄世峰
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 肿瘤干细胞 神经母细胞瘤 悬浮培养法 神经干细胞 细胞培养 裸鼠 荧光素酶 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（45）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 肿瘤干细胞
• 页码范围: 7260-7265
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4890字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.45.009

摘要

背景：神经母细胞瘤是儿童较为常见的实体瘤，儿童肿瘤受环境因素影响小，其与发育的关系紧密。而悬浮法是一种有效并可靠的获得肿瘤干细胞的方法。<br>　　目的：采用悬浮法培养人神经母细胞瘤SK-N-SH，获得具有干细胞特性的克隆球，并对其生物学特性进行鉴定。<br>　　方法：采用无血清悬浮培养的方法，获得具有克隆性增生的肿瘤球，免疫荧光鉴定克隆球细胞是否具有干细胞特性；通过荧光素酶标记SK-N-SH神经母细胞瘤，将所得克隆球与普通培养肿瘤细胞种植在裸鼠背部，活体成像监测细胞在裸鼠体内的增殖特性。<br>　　结果与结论：悬浮培养法可将SK-N-SH神经母细胞瘤培养成克隆球，将无血清培养的克隆球免疫荧光检测分子生物学标记，显示强阳性表达，将其种植于裸鼠背部皮下显示其具有较强增殖与转移的生物学特性。提示悬浮法培养的 SK-N-SH神经母细胞瘤克隆球，分子生物学标记巢蛋白 Nestin强表达，胶质原纤维酸性蛋白、特异性神经元管蛋白(Tuj-1)弱表达，具有神经干细胞的特性，在裸鼠体内具有较强的增殖性与转移侵袭性。