柚CCoAOMT基因的克隆与超表达载体构建

• 作者: 徐玉 潘东明 潘腾飞
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 柚 克隆 CCoAOMT基因 载体构建
• 年，卷（期）: 2014,（25）
• 所属期刊栏目: 园艺—研究报告
• 页码范围: 148-153
• 分类号: S666.3
• 语种: 中文

摘要

为探明咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)在柚[Citrus maxima (Burm.) Merr.]果实发育中对木质素单体合成的影响,克隆了柚CCoAOMT基因ORF序列并构建超表达载体转化至农杆菌.采用Trizol法提取柚汁胞总RNA,经反转录得到cDNA,根据已知柚CCoAOMT片段序列,设计其ORF引物.PCR扩增得到柚CCoAOMT基因ORF序列,长度为744 bp,编码247个氨基酸,与龙眼(Dimocarpuslongan)、麻疯树(Jatropha curcas)、杨树(Populus balsamifera)的CCoAOMT基因同源性大于90％.经软件预测,该酶定位于质膜的可能性最大,不具有跨膜结构.将柚CCoAOMT基因正向导入植物过表达载体p1301,位置在CaMV35S启动子的之后,并将载体转化至农杆菌EHA105.本研究得到的基因片段包含柚CCoAOMT基因ORF,成功构建植物超表达载体p1301-cmCCoAOMT,并导入农杆菌.含pl301-cmCCoAOMT的农杆菌株可转化多种植物受体,为深入研究该基因功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘东明	福建农林大学园艺学院	201	1594	19.0	27.0
5	潘腾飞	福建农林大学园艺学院	41	290	10.0	16.0
9	徐玉	福建农林大学园艺学院	2	1	1.0	1.0