瓜类黄化褪绿病毒上海分离物外壳蛋白的原核表达及其抗血清的制备

• 作者: 徐丽慧 戴富明 曾蓉 陆金萍 顾海峰
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: CCYV 外壳蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2014,（22）
• 所属期刊栏目: 植物保护——研究报告
• 页码范围: 276-281
• 分类号: S432.1
• 语种: 中文

摘要

利用RT-PCR技术扩增得到瓜类黄化褪绿病毒(cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)上海市嘉定分离物的外壳蛋白(coat protein,cp).序列分析结果表明,cp基因的核苷酸序列长度为753 bp,编码250个氨基酸,与已报道的CCYV其他分离物的cp核苷酸相似性均高于95％.将此基因克隆到原核表达载体pET32a(+)上,转化大肠杆菌BL21 (DE3)后IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析表明,CCYV cp在大肠杆菌中可表达出含有6-His标签的分子量约46 kDa的蛋白.纯化表达蛋白后免疫家兔制备抗血清,间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)结果显示,制备的抗血清可用于检测田间感病样品中的CCYV.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾海峰		24	90	6.0	9.0