大鼠肝星状细胞的培养改良与性质鉴定

• 作者: 任宾
• 来源期刊: 临床医药文献电子杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠肝星状细胞 培养 鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1680-1681,1683
• 页数: 3页
• 分类号: R657.3
• 字数: 2727字
• 语种: 中文

摘要

目的：肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）是一类胞浆内富含Vitamin A脂滴的特殊类型的细胞，激活后的HSC胞浆中Vitamin A脂滴减少活消失，是研究肝纤维化疾病的良好素材。本研究欲改良HSC细胞的培养方法，并鉴别四种HSC细胞鉴定方法的有效性。方法采用含0.2 mM油酸的完全培养基对已培养传代的大鼠肝星状细胞进行培养。分别采用油红0染色、Vitamin A脂滴的紫外激发、a-SMA免疫组化、a-SMA免疫荧光四种方法对培养的HSC进行鉴定。结果用含0.2 mM油酸的完全培养基培养的大鼠肝星状细胞，细胞形态饱满，胞浆不因传代而减少，细胞形态维持稳定，油红O染色后可清晰显示未激活HSC内的脂滴；紫外激发下Vitamin A脂滴发出极易淬灭的蓝绿色荧光；以泡球蚴囊液为外源性刺激，使HSC激活，a-SMA免疫组化染色激活的HSC胞浆均可见棕黄色颗粒状沉淀；a-SMA免疫荧光显示激活的HSC细胞胞浆均可见FITC的激发的绿色荧光。结论含0.2 mM油酸的完全培养基可有效维持细胞形态。油红0染液、Vitamin A脂滴的紫外激发可有效鉴定未激活的HSC，a-SMA免疫组化、a-SMA免疫荧光方法是鉴别激活的HSC的有效方法。