拟南芥中Fibrillarin基因的克隆·表达·纯化及与ak6蛋白相互作用研究

• 作者: 张飞云 李然 田兆丰
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 拟南芥 fibrillarin蛋白 ak6
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 20-23
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3594字
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究拟南芥中Fibrillarin基因的克隆、表达及纯化,并探索其与ak6蛋白的相互作用.[方法]利用pGEX-6P-1与Fibrilla-rin基因构建重组表达质粒,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,运用同样方法构建PET-28a-ak6原核表达质粒,获得His-ak6融合蛋白,并运用体外pull down技术验证二者的相互作用.[结果]在温度为37℃、诱导时间为16 ～20 h、IPTG浓度为0.5mmol/L时,fibrillarin蛋白的纯化浓度最高.试验成功获得了符合标准的RNA,并获得了与预期片段大小相符的清晰的目的条带;pull-down试验结果表明,拟南芥中fibrillarin蛋白与ak6蛋白具有相互作用.[结论]拟南芥ak6突变体植株可能由于ak6的缺失影响了rRNA前体的加工,从而抑制核糖体的合成,进而阻碍拟南芥茎的生长,使植株表现明显的矮小症状.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田兆丰	北京市农林科学院植物保护环境保护研究所	32	223	8.0	14.0
2	张飞云	首都师范大学生命科学学院	23	111	6.0	9.0
3	李然	首都师范大学生命科学学院	8	8	1.0	2.0