抑制BMI-1表达可增强人肝癌细胞对多柔比星的敏感性

• 作者: 孙红成 李敏 洪艳 田聆 薛鹏
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 抗药性,肿瘤 多柔比星 基因表达 BMI-1基因 ABCG2基因
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 237-245
• 页数: 9页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2015.11.744

摘要

目的:研究RNA干扰技术抑制B细胞特异性小鼠白血病病毒插入位点1(Bcell-specific murine leukemia virus integration site-1,BMI-1)基因表达对肝癌细胞多柔比星(doxorubicin,Dox)化疗耐药性的影响及其相关分子机制.方法:建立Dox耐药的人肝癌细胞系MHCC-97H/Dox(简称97H/Dox),同时以其亲本细胞系MHCC-97H(简称97H)为对照;采用MTT、细胞克隆形成和Transwell侵袭实验分别检测细胞的耐药性、克隆形成能力和侵袭能力;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中肿瘤相关分子的mRNA和蛋白表达水平.采用小干扰RNA (small interference RNA,siRNA)瞬时转染的方法抑制2种细胞中BMI-1基因的表达,然后再用MTT法检测耐药细胞97H/Dox和亲本细胞97H对Dox的耐药性变化,以及采用蛋白质印迹法检测亲本细胞97H中肿瘤相关蛋白的表达变化.结果:肝癌耐药细胞系97H/Dox的耐药性稳定,并呈多药耐药特点,其克隆形成数也明显多于亲本细胞97H (P＜0.05);相对于97H亲本细胞,97H/Dox耐药细胞中BMI-1、ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)和金属基质蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)分子的表达水平上调(P值均＜0.05).siRNA介导的BMI-1基因沉默可以显著提高97H亲本细胞及97H/Dox耐药细胞对化疗药物Dox的敏感性(P值均＜0.05).在97H亲本细胞中,BMI-1基因沉默可显著降低磷酸化Akt (phospho-Akt,p-Akt)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phospho-c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)和ABCG2的表达水平(P值均＜0.05).结论:BMI-1基因表达上调可能参与97H细胞耐药性的获得,抑制BMI-1表达可增强该细胞对化疗药物Dox的敏感性.因此,干预BMI-1表达可能是提高肝癌化疗反应性的一个候选策略.