栎属植物流式细胞术实验体系的建立与优化

• 作者: 方炎明 魏高明
• 来源期刊: 南京林业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 栎属植物 成熟叶片 流式细胞术 细胞核分离缓冲液
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 167-172
• 页数: 6页
• 分类号: S792.18
• 字数: 4777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.2015.01.001

摘要

为建立适于栎属植物的流式细胞核实验体系,分别利用Tris-MgCl2 Galbraith's、Marie's和Otto's细胞核分离缓冲液对麻栎、栓皮栎、白栎和短柄枹栎制备细胞核悬浮液.检验发现:Tris-MgCl2 Galbraith's缓冲液所制备样品未能检测出DNA峰,Otto's缓冲液制备的样品中,除白栎外其他3个样品的测试结果均较差,Marie's缓冲液所制备的4个样品测试DNA峰的变异系数(CV)均大于10％.采用正交设计方法对经典Marie's缓冲液中的β-巯基乙醇和Tween 20组分进行了优化,发现麻栎、栓皮栎、白栎和短柄枹栎的最适B-巯基乙醇浓度和Tween 20体积比分别为45 mmol/L和2.5％、15 mmol/L和2.0％、60 mmol/L和1.0％及30 mmol/L和1.0％.运用改进后的最适Marie's缓冲液进行流式细胞核测定,4种样品的变异系数均显著下降(在3.52％ ～4.81％之间),表明改进后的Marie's缓冲液对4种栎属植物的测试结果准确可信.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方炎明	南京林业大学生物与环境学院	195	3014	31.0	45.0
2	魏高明	南京林业大学生物与环境学院	1	5	1.0	1.0