GST-β-catenin融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

• 作者: 姚强 梁峰 沈涛 贾长青
• 来源期刊: 解剖学研究
• 关键词: β-catenin 原核表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 104-107
• 页数: 4页
• 语种: 中文

摘要

目的 构建GST-β-catenin融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.col)中诱导表达.方法 从COS-7细胞中提取mRNA,反转录为cDNA.用PCR方法扩增出β-catenin基因全长,通过BamHI和SalⅠ酶切位点将其定向插入pGEX-4T-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-β-catenin,并转化E.coli DH5α,通过限制性内切酶酶切电泳和DNA测序鉴定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷大量诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定.结果 酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒GST-β-catenin,并用Western blot方法证实了GST-β-catenin融合蛋白的表达.结论 成功构建了GST-β-catenin原核表达载体,并证实了其在原核细胞大肠埃希菌中的表达,为进一步纯化β-catenin及研究其结构与功能提供了前提基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈涛		27	129	5.0	11.0
2	梁峰		34	157	8.0	11.0
3	贾长青		67	354	11.0	15.0
4	姚强		7	19	3.0	4.0