BRAＦV600E突变基因沉默可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖

• 作者: 何云 吴剑 周晓红 张玉莲 李真华 王洪鹏
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 甲状腺肿瘤 癌,乳头状 原癌基因蛋白质B-raf RNA干扰 细胞增殖 细胞周期
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 276-282
• 页数: 7页
• 分类号: R736.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2015.11.749

摘要

目的:通过RNA干扰技术使v-raf鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1 (v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1,BRAF)的突变基因BRAFV600E表达沉默,探讨该基因沉默在甲状腺乳头状癌细胞体外增殖中的作用.方法:将携带靶向BRAFV600E基因的短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)的质粒载体(命名为BRAFV600E-shRNA)转染甲状腺乳头状癌CGTHW3细胞株,然后采用半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测BRAFV600E-shRNA转染对BRAFV600E突变基因表达的抑制作用,以及丝裂原细胞外激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen extracellular linase/extracellular signal-regulated kinase,MEK/ERK)信号通路相关蛋白表达水平的变化;采用MTT法检测BRAFV600E突变基因沉默后甲状腺乳头状癌细胞体外增殖能力的变化;采用FCM法检测细胞周期分布的变化.结果:特异性BRAFV600E-shRNA转染可明显抑制甲状腺乳头状癌细胞中BRAFV600E突变基因的mRNA和蛋白表达,且使MEK/ERK信号通路中Ras、磷酸化MEK (phospho-MEK,p-MEK)和p-ERK蛋白的表达量明显减少(P值均＜ 0.05).与未转染的空白对照组相比,BRAFV600E-shRNA转染后72h时CGTHW3细胞的增殖活性明显降低(P＜0.05);转染组中G0/G1期细胞所占比例明显高于空白对照组,而S期细胞所占比例明显降低(P值均＜ 0.05).结论:BRAFV600E突变基因沉默可能通过阻断MEK/ERK信号通路,有效抑制甲状腺乳头状癌细胞的体外增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李真华		24	219	8.0	14.0
2	张玉莲		8	35	4.0	5.0
3	周晓红		21	94	6.0	8.0
4	何云		10	22	2.0	4.0
5	吴剑		9	53	4.0	7.0
6	王洪鹏		2	6	1.0	2.0