利用非经典分泌蛋白质实现脂肪酶A的分泌表达

• 作者: 崔静 张灏 王光强 陈卫 陈洁 陈海琴 顾震南
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 非经典分泌蛋白质 脂肪酶A
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 198-204
• 分类号: Q933
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20140016

摘要

[目的]以枯草芽孢杆菌脂肪酶A(LipaseA)为报告蛋白,尝试利用4种非经典分泌蛋白质及其前50个氨基酸作为分泌信号以实现其分泌表达.[方法]我们扩增了脂肪酶A的编码基因和非经典分泌蛋白质的编码序列,构建了8种针对脂肪酶A的分泌表达载体,并转化至枯草芽孢杆菌WB800菌株,通过测定重组菌株的酶活、利用蛋白质电泳和免疫印迹等技术检测脂肪酶A的分泌情况[结果]以PdhA的氨基酸序列和SodA、Eno的前50氨基酸序列作为分泌信号的重组菌株较好的实现了脂肪酶A的分泌表达.[结论]部分非经分泌蛋白质的编码基因或其前50个氨基酸序列能够引导脂肪酶A分泌至细胞外.