巢式荧光PCR结合高分辨熔链曲线检测结核分枝杆菌及其亚型

• 作者: 何萍 徐俊 朱宏 汪健 邵雪君 陶云珍 黄莉莉
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 巢式PCR 熔链曲线 亚型
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 342-345
• 页数: 4页
• 分类号: R378.91|R393
• 字数: 3680字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y150054

摘要

目的：建立一种检测结核分枝杆菌及其亚型的PCR方法。方法：根据人型及牛型结核分枝杆菌硝酸还原酶（nitrate reductase，narGHJI）基因启动子区215位上T-C的转换，设计巢式荧光PCR结合高分辨熔链曲线检测结核分枝杆菌及其亚型，测定其敏感性，并用琼脂糖凝胶电泳验证观察巢式荧光PCR产物的特异性。以人型结核杆菌标准株（H37 Ra）、卡介苗培养菌液、人型临床分离株和牛型临床分离株为标本，高分辨熔链曲线分析结核分枝杆菌亚型正态化熔链曲线及熔链温度。结果：巢式荧光PCR特异性地检出结核分枝杆菌narGHJI基因，其敏感性比荧光定量PCR高10倍左右；人型及牛型结核分枝杆菌narGHJI基因PCR产物的高分辨熔链曲线分成2个不同组合，熔链温度分别为（83．08±0．08）℃和（83．96±0．09）℃，差异有统计学意义（t＝217．23，P＜0．05）。结论：成功建立检测结核分枝杆菌及其亚型的巢式荧光PCR结合高分辨熔链曲线法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪健	苏州大学附属儿童医院普外科	124	439	11.0	15.0
2	何萍	苏州大学附属儿童医院检验科	16	85	5.0	9.0
3	陶云珍	苏州大学附属儿童医院检验科	64	530	14.0	19.0
4	朱宏	苏州大学附属儿童医院检验科	53	420	12.0	18.0
5	徐俊	苏州大学附属儿童医院检验科	45	284	11.0	14.0
6	邵雪君	苏州大学附属儿童医院检验科	51	226	9.0	13.0
7	黄莉莉	苏州大学附属儿童医院检验科	6	18	2.0	4.0