应用SSA报告载体提高ZFN和CRISPR/Cas9对猪IGF2基因的打靶效率

• 作者: 丛佩清 何祖勇 刘志国 吴金青 梅瑰 陈瑶生
• 来源期刊: 遗传
• 关键词: IGF2基因 ZFN CRISPR/Cas9 SSA报告系统
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 55-62
• 页数: 8页
• 字数: 6147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16288/j.yczz.2015.01.008

摘要

IGF2(Insulin-like growth factor 2)基因作为最复杂多样的生长因子之一，对猪胎儿发育以及出生后生长发育和肌肉生成起着非常重要的作用。通过基因组编辑技术对我国本地猪种的 IGF2基因作精确的遗传修饰，对于提高本地猪种的瘦肉率具有重要的育种意义。文章在蓝塘猪胎儿成纤维细胞(Porcine fetal fibroblasts, PEF)中检测了锌指核酸酶(Zinc finger nucleases, ZFN)和CRISPR/Cas9对IGF2基因的打靶效率，结果表明CRISPR/Cas9对IGF2基因的切割效率最高可达9.2%，显著高于ZFN的切割效率(<1%)，但两者均未达到作为体细胞核移植(Somatic nuclear transfer, SCNT)供体细胞所需的打靶效率。应用SSA (Single-strand annealing)报告载体筛选技术来富集IGF2基因被ZFN和CRISPR/Cas9修饰过的PEF细胞，结果表明，该技术可使CRISPR/Cas9的打靶效率提高5倍左右，对ZFN的打靶效率具有更大的增强作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈瑶生	中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室	53	239	10.0	13.0
2	刘志国	中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室	12	47	3.0	6.0
3	丛佩清	中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室	4	20	1.0	4.0
4	吴金青	中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室	1	19	1.0	1.0
5	梅瑰	广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室	1	19	1.0	1.0