中成药DNA提取技术优化及其在人参类制剂分子鉴定中的应用

• 作者: 刘智祖 刘良 吴文如 周华 王英平 程春松 谭天琪 龙泽
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 中成药 DNA 分子鉴定 人参类制剂 CTAB法 淀粉 蔗糖 葡萄糖
• 年，卷（期）: 2015,（17）
• 所属期刊栏目: 药剂与工艺
• 页码范围: 2549-2555
• 分类号: R284.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.17.008

摘要

目的 建立并完善从中成药及保健品中提取DNA的有效方法,并在人参类制剂中进行验证.方法 使用中成药和保健品中常用的辅料(如淀粉、蔗糖、葡萄糖等)模拟CTAB法提取DNA过程,用以筛选影响提取DNA效率的因素;使用甲醇作为沉淀试剂优化传统的CTAB法,并使用MAS-PCR方法对市场上人参类中成药及保健品进行分子鉴定,以验证优化的技术.结果 中成药及保健品中的淀粉(包括药源性淀粉和辅料添加的淀粉)通过CTAB反应后生成极性较大的复合物,其与70％乙醇不能互溶,而且在碱性条件下对DNA有强烈的溶解作用,从而影响了CTAB法提取DNA的提取效率;利用甲醇作为沉淀试剂能够有效去除CTAB裂解过程中产生的高极性复合物的影响,70％甲醇-醋酸钠溶液能够有效提取中成药及保健品的DNA;利用优化的DNA提取方法和MAS-PCR法实现了11种市售人参类制剂的快速分子鉴定,结果显示8种与商品描述一致、1种有掺伪情况、2种为伪品.结论 使用甲醇作为沉淀试剂优化传统的CTAB法,可以较好地克服中药制剂中淀粉对DNA提取的不利影响,可以有效地实现基于DNA的中药制剂分子鉴定.