三氧化二砷对小鼠卵母细胞线粒体DNA氧化损伤作用及其机制

• 作者: 古雪岩 张文雅 张迎梅 牛志丹
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 三氧化二砷 活性氧 线粒体DNA 氧化损伤 小鼠卵母细胞
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 808-815
• 页数: 8页
• 分类号: R995
• 字数: 5024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2015.05.057

摘要

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对小鼠卵母细胞线粒体DNA（mtDNA）的氧化损伤作用及其作用机制。方法①体外实验挤压正常小鼠卵巢获取卵母细胞，培养成熟后，分为As2O31和2μmol·L-1单独处理组、N-乙酰半胱氨酸（NAC）5 mmol·L-1处理组、2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧基（Tempo）1 mmol·L-1处理组、As2O31或2μmol·L-1+NAC 5 mmol·L-1共处理组、As2O31或2μmol·L-1+Tempo 1 mmol·L-1共处理组，培养20 h后，收集成熟卵母细胞进行后续实验指标测定。②体内实验雌性昆明小鼠ip给药，分为As2O31和2 mg·kg-1染毒组、As2O31或2 mg·kg-1+NAC 200 mg·kg-1组，每日1次，连续60 d，椎脱臼处死取卵母细胞。2′，7′-二氯荧光黄双乙酸盐荧光染色检测细胞内活性氧（ROS）水平；8-羟基脱氧鸟苷酶（8-OHdG）联免疫反应检测提取mtDNA中8-OHdG含量；Western蛋白印迹法检测DNA聚合酶γ（Polγ）和线粒体转录因子A（mtTFA）的蛋白表达；β-半乳糖苷酶（β-Gal）报告基因检测试剂盒检测溶酶体活力。结果①体外实验As2O3单独处理组小鼠卵母细胞中ROS和8-OHdG含量升高，Polγ和mtTFA蛋白表达水平降低（P<0.05）；而As2O3与NAC或Tempo共处理组卵母细胞中ROS含量减少，8-OHdG水平降低，Polγ和mtTFA蛋白表达水平显著上调（P<0.05）。②体内实验 As2O3单独处理组小鼠卵母细胞中ROS和8-OHdG含量升高，Polγ和mtTFA蛋白表达水平降低（P<0.05）；As2O3与NAC共处理组小鼠卵母细胞中ROS含量减少，8-OHdG水平降低，Polγ和mtTFA蛋白表达水平提高（P<0.05）。As2O3单独处理组体外培养的卵母细胞，β-Gal活力显著提高（P<0.05），而As2O3与NAC或Tempo共处理组β-Gal活力显著下降（P<0.05）。体内实验各处理组β-Gal活力无显著差异。结论砷暴露可诱导小鼠卵母细胞大量生成ROS，抑制线粒体基因组修复与复制相关因子Polγ及mtTFA的表达，同时改变溶酶体活力，最终诱发mtDNA氧化损伤。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张迎梅	兰州大学生命科学学院甘肃省环境生物监测与修复重点实验室	54	1053	20.0	31.0
2	张文雅	兰州大学生命科学学院甘肃省环境生物监测与修复重点实验室	5	24	3.0	4.0
3	牛志丹	兰州大学生命科学学院甘肃省环境生物监测与修复重点实验室	1	2	1.0	1.0
4	古雪岩	兰州大学生命科学学院甘肃省环境生物监测与修复重点实验室	4	2	1.0	1.0