谷胱甘肽双功能合成酶的克隆表达、酶学性质及其应用的研究

• 作者: 徐志南 杨修亮 杭宝建 石礼涛 蔡谨 陈斌斌 黄磊
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 谷胱甘肽 谷胱甘肽双功能酶 大肠杆菌 Listeria monocytogenes 酶法催化 亲和层析
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 377-381
• 页数: 5页
• 分类号: Q55
• 语种: 中文

摘要

谷胱甘肽是广泛存在于生物体内的生物活性三肽化合物,因其具有重要的生理功能而在医药、食品、化妆品等行业有着广泛的应用,该研究克隆了来自Listeria monocytogenes的谷胱甘肽双功能酶基因gshF,以pET28a(+)作为表达载体,利用大肠杆菌实现重组表达,研究表明,重组菌于37℃培养4h后,在28℃下经0.2 mmol/L IPTG诱导表达,胞内酶活可达2 318 U/L.表达产物破胞、离心、亲和层析后,进一步考察了其酶学性质,表明该酶催化最适温度37℃,最适pH 8.5,还研究了Mg2+和ATP对其的影响以及该酶的稳定性.最终通过GshF体外酶催化合成谷胱甘肽,得到的最高产量为2.58 g/L.这些对该酶在谷胱甘肽生物合成上的应用有重要的借鉴作用.