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摘要:
目的:观察microRNA-486-5p(miR-486-5p)在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞(hMSCs)凋亡中的作用并探讨其作用机制。方法:hMSCs经培养鉴定后分为5组:空白对照组、H2 O2组、miR-486-5p模拟物+H2 O2组、抑制物(αnti-miR)+H2O2组及相应的阴性对照(scrambled control)+H2O2组。荧光定量PCR(real-time PCR)检测氧化应激诱导hMSCs凋亡过程中miR-486-5p的表达变化。用脂质体分别转染miR-486-5p的模拟物、抑制物及阴性对照到hMSCs。应用MTT、Hoechst标记和流式细胞术的方法检测miR-486-5p对氧化应激介导细胞活性下降及凋亡效应的影响,Western blotting检测凋亡相关蛋白、Akt与其磷酸化水平,采用试剂盒测定caspase-3活性。结果:H2O2诱导hMSCs凋亡过程中miR-486-5p的表达较对照组显著下降(P<0.05)。与阴性对照组相比,在hM-SCs中过表达miR-486-5p,能使细胞在氧化应激情况下活性显著下降,凋亡发生率增高,蛋白Bcl-2/Bax 比值、caspase-3酶原含量及Akt磷酸化水平降低,caspase-3活性增强;而使用抑制物阻遏miR-486-5p的作用后,细胞在氧化应激条件下活性增加,凋亡发生率降低,蛋白Bcl-2/Bax比值及Akt磷酸化水平升高,caspase-3活性下降。结论:过表达miR-486-5p促进氧化应激引起的hMSCs凋亡,阻遏miR-486-5p的作用抑制氧化应激条件下的hMSCs凋亡,其中作用机制可能与调控Akt通路有关。
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文献信息
篇名 miR-486-5p在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞凋亡中的作用
来源期刊 中国病理生理杂志 学科 医学
关键词 MicroRNA-486-5p 间充质干细胞 氧化应激 细胞凋亡
年,卷(期) 2015,(3) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 524-529
页数 6页 分类号 R363.2+1
字数 4089字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.03.024
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间充质干细胞
氧化应激
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中国病理生理杂志
月刊
1000-4718
44-1187/R
大16开
广东省广州市黄埔大道西601号
46-98
1985
chi
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