吖啶橙荧光染色法在循环肿瘤细胞筛查中的应用

• 作者: 刘敏 刘淑芬 张淑敏 李美 韩荣 马富玲
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 吖啶橙 显微镜检查,荧光 癌,肾细胞 循环肿瘤细胞
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 诊断技术
• 页码范围: 792-795
• 页数: 4页
• 分类号: R737.11|R446-39
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.07.025

摘要

目的：应用吖啶橙荧光（AO-F）染色法搭建循环肿瘤细胞（CTCs）筛选平台，并将其应用于肾癌患者外周血CTCs筛查。方法选择转移性肾细胞癌患者27例（研究组），用不同浓度的血清培养肾癌原代肿瘤细胞和细胞系769-P，分别制备涂片于荧光显微镜下，观察细胞形态及着色情况是否一致；随机计数5个视野下AO-F阳性（+）细胞占769-P细胞的比例，评估AO-F染料对肿瘤细胞的敏感性；清晨抽取10例健康体检者（对照组）空腹外周血，红细胞裂解后富集单个核细胞，配制含1×106个细胞的悬液；取对数生长期肾肿瘤细胞，配制成每管分别含500、200、100、50、10个肿瘤细胞的悬液，与1×106个单个核细胞混合，建立肾癌外周血CTCs模型，AO-F染色后计算肿瘤细胞回收率；另计算2组外周血AO-F+细胞的检出率，分析其与患者临床参数之间的关系。结果肾癌原代肿瘤细胞和细胞系769-P均呈现出鲜明色彩，两者具有相似的形态学特征，平均每个视野下AO-F+细胞占肿瘤细胞的比例为93%±3%。含500、200、100、50个细胞的悬液组肿瘤细胞回收率（%）分别为10.2±3.8、9.2±2.3、10.8±2.6、10.5±1.9，组间差异无统计学意义（P>0.05）。含10个细胞的悬液组偶然可检测到AO-F+细胞。对照组无一例阳性，研究组9例检测到AO-F+细胞，检出率为33.33%；检出率在不同年龄、性别、肿瘤大小、病理类型、Furhman分级、转移部位及带瘤状态间差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 AO-F染色法筛查肾癌患者外周血CTCs切实可行，并具有高度的特异性和可重复性，对早期预测肾癌复发转移有一定参考价值。