氯化钴模拟低氧环境下人脐带间充质干细胞增殖及基因蛋白的表达

• 作者: 尹娇娇 杨柯 欧剑锋 王存邦 白海 韩潇 韩燕霞
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脐带脐血干细胞 人脐带间充质干细胞 低氧 氯化钴 增殖 基因表达 缺氧诱导因子1α
• 年，卷（期）: 2015,（45）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 7268-7273
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6810字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.45.010

摘要

背景：氯化钴可促进人脐带源性间充质干细胞的增殖，具有时间和浓度依赖性，并对其基因蛋白表达具有调控作用。目的：研究氯化钴模拟的低氧环境对人脐带源性间充质干细胞的增殖及基因蛋白表达的影响，旨在建立高效的间充质干细胞体外培养扩增体系。方法：采用组织块法提取人脐带间充质干细胞，氯化钴模拟化学低氧环境，在不同浓度(0，100，150，200，250μmol/L)和不同时间(0，1，2，3，4 d)条件下，用流式细胞仪进行细胞表面相关抗原的鉴定及细胞周期检测；CCK-8法测定细胞增殖情况；RT-PCR测定缺氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶、基质细胞衍生因子1、白细胞介素6、转化生长因子β mRNA的表达；Western blot测定缺氧诱导因子1α蛋白的表达。结果与结论：人脐带间充质干细胞表面相关抗原CD29、CD73、CD90、CD105表达阳性，CD31、CD14、CD34、CD45、CD11b、HLA-DR呈阴性表达，且不受氯化钴模拟的低氧环境影响。氯化钴模拟的化学性低氧可促进人脐带间充质干细胞增殖，且具有一定时间及浓度依赖性。RT-PCR检测到低氧组缺氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶、基质细胞衍生因子1 mRNA表达上调，而白细胞介素6及转化生长因子β mRNA表达下调，差异有显著性意义(P <0.05)。低氧组中缺氧诱导因子1α蛋白表达增高。结果表明氯化钴模拟的体外低氧环境能促进人脐带间充质干细胞增殖，最佳浓度为200μmol/L，但过高浓度(250μmol/L)时反而抑制其增殖，机制可能与缺氧诱导因子1α基因与蛋白表达增加相关。