摘要:
目的 体外检测培养细胞与生物工程水凝胶材料的相互影响,为体外培养细胞与生物工程水凝胶共移植治疗提供理论依据. 方法 选择两款不同组分的水凝胶Matrigel和PuraMatrix作为实验材料,以EPCs作为检测细胞,将EPCs培养于不同浓度的Matrigel(l0%、20%、30%)或PuraMatrix(0.25%、0.5%、1%)表面,或与不同浓度的Matrigel或PuraMatrix混悬培养,于培养的不同时间观察培养细胞的形态,并用Alamar Blue法检测细胞的增殖情况,以确定材料的细胞毒性.观察EPCs在水凝胶中的成管化状态,以检测细胞是否仍具有生理功能. 结果 三种浓度Matrigel中30%的Matrigel细胞毒性较大,而三种浓度的PuraMatrix中1%的PuraMatrix细胞毒性较大.EPCs培养于Matrigel表面较混悬其中的细胞增殖率高,而且此差异随Matrigel的浓度增高而增强.EPCs在20%和30%的Matrigel表面培养均能成管化,在10%的Matrigel表面和混悬其中培养7d,多数细胞沉底.20%的Matrigel中培养7d能够立体成管化.而30%的Matrigel中,EPCs仅能伸出少数突起,不能成管化.PuraMatrix在0.25%和0.5%的浓度时,EPCs培养于PuraMatrix表面与细胞混悬其中的细胞增殖率相比无明显差异;而在1%时EPCs培养于PuraMatrix表面和混悬其中存活率均很低.EPCs在0.25%和0.5%的PuraMatrix表面培养,细胞能够穿入PuraMatrix中.而在0.25%的PuraMatrix中培养细胞可附着于材料上,但较难成管化,0.5%的PuraMatrix中培养7d能够成管化.三种细胞密度相比,107个/ml的细胞密度EPCs更容易体外成管化. 结论 Matrigel和PuraMatrix在适当的浓度(20% Matrigel和0.5% PuraMatrix)均能与培养细胞良好的相容,并且起到支撑作用,模拟正常生理状态,给细胞提供一个三维生长环境.由于PuraMatrix为人工合成肽产物,降解产物无毒性,可能是更适合移植的生物材料.