高效液相色谱-同位素稀释-串联质谱法测定人源瘦素的含量

• 作者: 孙雪晴 宋德伟 徐蓓 李红梅 田亚平 胡高飞 颜光涛
• 来源期刊: 质谱学报
• 学科: 化学
• 关键词: 人源瘦素 准确定量 同位素稀释质谱法 标准物质 溯源性
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 16-22
• 页数: 7页
• 分类号: O657.63
• 字数: 5582字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7538/zpxb.youxian.2014.0048

摘要

为准确测定人源瘦素的含量,建立了蛋白水解-高效液相色谱-同位素稀释-串联质谱(HPLC-IDMS)测定人源瘦素纯品绝对含量的方法,并对人源瘦素蛋白水解时间进行优化.结果表明,人源瘦素中的被测氨基酸在温度为110℃,6 mol/L HC1溶液中水解40 h可达平衡.水解样品通过高效液相色谱分离后,使用多反应监测模式(MRM)分别检测脯氨酸m/z 116＞m/z 70(Pro)和m/z 121＞m/z 74(标记Pro)离子对,缬氨酸m/z 118＞m/z 72(Val)和m/z 123＞m/z 76(标记Val)离子对,亮氨酸m/z 132＞m/z 86(Leu)和m/z 142＞m/z 96(标记Leu)离子对,根据检测结果计算得出人源瘦素纯品的含量为0.582 g/g,扩展不确定度为0.014 g/g(k=2),这与纯度扣除法测定结果基本一致,标准偏差为4.8％.该方法提高了人源瘦素含量测定的准确度和精密度,使测量结果可溯源至SI单位,为人源瘦素标准物质的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田亚平	解放军总医院生化科	263	2181	23.0	37.0
2	颜光涛	解放军总医院生化科	148	624	12.0	15.0
3	胡高飞		18	139	6.0	11.0
4	宋德伟		14	15	3.0	3.0
5	李红梅		118	648	13.0	21.0
6	徐蓓		26	122	5.0	10.0
7	孙雪晴		2	7	2.0	2.0