家蚕BmPP基因的克隆及在Bm-12细胞的表达

• 作者: 张若男 李彩婷 杨婉莹 黄旭
• 来源期刊: 广东蚕业
• 学科: 农学
• 关键词: LPS MD-2 TLR4 家蚕 Bmpp
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 分类号: S888.72
• 字数: 3552字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1205.2015.02.08

摘要

MD-2（related lipid recognition protein，ML蛋白质）是哺乳动物中一类重要的脂类识别蛋白，可以识别革兰氏阴性杆菌细胞壁的主要组分脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS），二者形成复合体后被跨膜蛋白质受体TLR4（Toll like receptor 4）识别，进而启动下游免疫信号通路。在鳞翅目昆虫家蚕中，研究发现LPS可以诱导其体内抗菌肽的表达。为了研究家蚕中参与LPS识别的跨膜蛋白及信号通路，论文通过生物信息学分析家蚕基因组数据库中的MD-2类似基因，通过对其结构域分析，发现家蚕具有与哺乳动物中的MD-2相似的保守结构域。同时抽提脂肪体RNA，通过RT-PCR获得基因，将其克隆至pIEx-4载体上转染家蚕Bm12细胞，48 h后Western-blotting检测发现成功表达并分泌到细胞培养基中。研究结果将为进一步研究LPS诱导家蚕细胞发生免疫反应的通路研究提供材料。