谷胱甘肽亲和层析介质的制备条件及其层析特性研究

• 作者: 刘俊伟 唐昭娜 张翠英 易秋分 朱显明 董辉 蒋永吉 陈文成
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 谷胱甘肽亲和层析 活化 环氧基修饰密度 载量
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 【食品与生物技术】
• 页码范围: 7-14
• 页数: 8页
• 分类号: Q81
• 字数: 5606字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20140143

摘要

以琼脂糖凝胶4FF(Sepharose 4 Fast Flow)为基质，1，4-丁二醇二缩水甘油醚(BDGE)为活化剂，通过活化、偶联谷胱甘肽(GSH)，得到 GSH 亲和层析介质．实验结果表明：活化及偶联的优化条件为10,mL 基质加入0.42,g NaOH、15,mL 二甲基亚砜(DMSO)、15,mL BDGE，反应温度为40,℃，反应时间为6,h；偶联溶液 pH 6.5，反应温度为37,℃，反应时间为24,h ．在此条件下，环氧基修饰密度可达60～65,μmol/mL；所制备的介质载量为(14.19±0.98)mg/mL．以此介质对谷胱甘肽 S–转移酶(GST)、融合蛋白 GST-Bcl-2、GST-Ald、GST-PTPN12进行纯化，结果表明，该介质纯化效果较好、载量高、稳定性能较好，可重复使用．