肺炎衣原体外膜蛋白Omp85的重组表达及其复性条件研究

• 作者: 张素芬 徐亭亭 李佳萌 李素梅 李素芹 李越希 潘英 王旻 齐永
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 肺炎衣原体 Omp85蛋白 蛋白表达 蛋白复性
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 392-395
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 语种: 中文

摘要

肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,CPn)可致人急性呼吸道疾病,是引起社区获得性肺炎(Community acquired pneumonia,CAP)的主要病原体之一.Omp85蛋白是CPn上一个重要的、与其粘附和入侵宿主相关的表面蛋白,也是肺炎衣原体肺炎病的候选诊断分子和候选亚单位疫苗,因此成功表达与纯化复性的重组Omp85蛋白对揭示CPn致病机制,研发肺炎衣原体肺炎诊断试剂及疫苗具有重要的意义.该研究通过生物信息学方法分析并选取0mp85表位富集区,优化并化学合成其核苷酸序列,构建重组载体并转化大肠杆菌,使用SDS-PAGE方法筛选高表达工程菌并分析其表达形式,结果发现目的蛋白主要以包涵体形式表达.使用镍柱亲和层析复性、葡聚糖凝胶层析复性、稀释复性和透析复性4种方法对目的蛋白进行复性,均获得复性蛋白,葡聚糖凝胶层析复性方法对Omp85的复性效果优于其它3种.该研究为进一步揭示CPn致病机制以及研发肺炎衣原体肺炎的诊断试剂和疫苗奠定了基础.