microRNA-204抑制强直性脊柱炎成纤维细胞成骨分化

• 作者: 冯仲锴 刘汝银 孙永强 岳宗进 王新立
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 强直性脊柱炎 miR-204 成骨分化 成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1374-1378
• 页数: 5页
• 分类号: R681.51
• 字数: 4429字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13315/j.cnki.cjcep.2015.12.013

摘要

目的 探讨microRNA-204(miR-204)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)成纤维细胞中的表达及其对BMP-2和TGF-β1诱导的成骨分化的功能及其可能的作用机制.方法 收集5例骨AS和5例非AS的髋关节囊组织;采用原代细胞培养方法分离培养成纤维细胞;细胞实验分为4组,分别为正常对照组、AS对照组、AS+ miRNA-NC组和AS+ miR-204组;除了正常对照组和AS对照组外,AS+ miRNA-NC组、AS+ miR-204组的培养基中分别加入7 ng/ml的BMP-2和5 ng/ml的TGF-β1;miRNA-NC和miR-204 mimics采用脂质体Lipofectamine 2000进行转染;实时荧光定量PCR法检测miR-204、Ⅰ型胶原(c0l-lagen type Ⅰ,Col Ⅰ)、骨钙素(osteopontin,OPN)和核心结合蛋白因子2(Runx2) mRNA的表达水平;Western blot法检测Runx2 蛋白表达水平;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP活性;双荧光素酶报告基因检测miR-204与Runx2的靶向调控关系.结果 miR-204在AS来源的成纤维细胞及BMP-2和TGF-β1处理的细胞中表达降低.过表达miR-204可以显著抑制BMP-2和TGF-β1诱导的ALP活性增高,Col Ⅰ和OPN的表达水平上升.另外,miR-204可以靶向调控Runx2,并且抑制Runx2的表达水平.结论 miR-204与AS成纤维细胞成骨分化密切相关,其可以通过靶向调控Runx2的表达来调节成纤维细胞的骨化,为AS的治疗提供潜在的治疗靶点.