毛细管电泳与微流控芯片电泳快速检测粪便中腺病毒的方法建立

• 作者: 任冬霞 李永新 杨丹旎 王乙棋 赵洪玥 阮佳 龙品品
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 腺病毒 聚合酶链反应 毛细管电泳 微流控芯片电泳 激光诱导荧光检测
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 615-618,627
• 语种: 中文

摘要

目的 建立粪便中腺病毒的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光快速检测方法.方法 采用试剂盒法提取粪便中腺病毒DNA,选择腺病毒六邻体基因保守区域进行PCR扩增反应.PCR产物分别用高灵敏度的SYBR Gold和SYBR Orange核酸荧光染料进行标记,在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下分离,采用激光诱导荧光检测特异性PCR扩增产物.结果 腺病毒扩增产物在优化的毛细管电泳和微流控芯片电泳条件下可分别于9 min和6 min内完成检测.将PCR扩增产物测序,并与NCBI基因库中核酸序列比对,结果表明所选用的扩增序列特异性良好.商品化DNA Marker毛细管电泳和微流控芯片电泳对目标DNA片段bp值求得的日内精密度分别为1.14％～1.34％和1.18％～1.48％,日间精密度分别为1.27％～2.76％和2.85％～4.06％.毛细管电泳-激光诱导荧光法和微流控芯片电泳-激光诱导荧光法检测腺病毒的灵敏度分别为2.33×102 copies/mL和2.33×103 copies/mL.两种方法用于实际粪便样品测定,准确度高.结论 本研究建立的PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光和PCR-微流控芯片电泳-激光诱导荧光检测方法能够快速、灵敏、准确地检测出粪便中的腺病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李永新	四川大学华西公共卫生学院	29	318	9.0	17.0
2	阮佳	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	6	8	2.0	2.0
3	任冬霞	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	2	3	1.0	1.0
4	杨丹旎	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	1	3	1.0	1.0
5	龙品品	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	1	3	1.0	1.0
6	赵洪玥	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	1	3	1.0	1.0
7	王乙棋	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	1	3	1.0	1.0