MCUR1蛋白的表达纯化以及晶体初筛

• 作者: 金昊
• 来源期刊: 南开大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: MCU MCUR1 线粒体钙离子摄取 蛋白表达纯化 X射线衍射
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 42-46
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

Mitochondrial Ca2+ Uniporter (MCU)是线粒体钙离子通道的一个主要成分.近期研究发现Mitochondrial calcium uniporter regulator 1 (MCUR1)是MCU的一个调节蛋白.研究通过合成人源的MCUR1基因,利用PCR得到目的DNA片段,克隆到表达载体PET.32a,构建Trx-MCUR1融合蛋白表达质粒PET.32a-MCUR1.克隆质粒转化表达菌E.coli BL21 (DE3)Condon Plus,经IPTG诱导表达.将得到的融合蛋白经过镍亲和层析柱进行初步纯化,然后加入PreScission酶分离目的蛋白与标签,再用离子柱和分子筛层析进行进一步的纯化以去除标签以及杂蛋白.浓缩纯化后的目的蛋白,进行晶体初筛以及后期的晶体优化.最后将生长的晶体进行初步的X射线衍射分析.

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1	金昊		1	0	0.0	0.0