栅藻Scenedesmus sp.蛋白质提取方法优化及氨氮与硝态氮处理下蛋白质组表达差异

• 作者: 向文洲 吴华莲 吴后波 李涛 梁青 王兵 王广华 贾其坤
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 双向电泳 栅藻 细胞破碎 蛋白纯化 氨氮毒害
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 125-130
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.11.014

摘要

旨在寻找一种快速高效提取栅藻Scenedesmus sp.蛋白质的方法并研究氨氮对该藻的毒害机制。使用液氮研磨和超声细胞破碎进行细胞破碎，丙酮沉淀和TCA-丙酮沉淀法进行蛋白纯化，SDS-PAGE进行蛋白样品丰度检验，2-DE电泳技术对差异表达蛋白进行分析。结果显示，对于栅藻Scenedesmus sp.，液氮研磨破碎细胞效果明显优于超声细胞破碎法，前者细胞破碎完全，内容物充分外泄。TCA-丙酮沉淀纯化得到的蛋白样品不仅浓度高，而且丰度和纯度均显著优于丙酮沉淀法。氨氮毒害作用下栅藻Scenedesmus sp.蛋白差异表达分析结果显示85个表达降低的蛋白和25个表达升高的蛋白，这些蛋白涉及光合作用、二氧化碳固定、糖酵解、蛋白质合成及非正常折叠蛋白降解、细胞分裂和物质运输，以及自由基清除等途径。应用液氮研磨和TCA-丙酮沉淀法可快速高效地提取栅藻Scenedesmus sp.蛋白质，氨氮毒害作用涉及光合作用、脂肪酸合成、非正常折叠蛋白降解等多种代谢途径。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李涛	中国科学院南海海洋研究所	164	1585	23.0	31.0
2	梁青	中国科学院南海海洋研究所	36	272	8.0	15.0
6	吴后波	中国科学院南海海洋研究所	28	404	8.0	20.0
7	王广华	中国科学院南海海洋研究所	14	319	8.0	14.0
8	吴华莲	中国科学院南海海洋研究所	7	50	4.0	7.0
9	王兵		8	270	4.0	8.0
10	贾其坤	中国科学院南海海洋研究所	1	2	1.0	1.0