携带口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒样颗粒的表达及其免疫原性研究

• 作者: 姜平 宋艳华 王芳 盛蓉 胡波 范志宇 薛家宾 魏后军
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 病毒样颗粒 口蹄疫病毒 B细胞表位 载体
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 页码范围: 142-149
• 页数: 8页
• 分类号: S858.2912.65|Q78
• 字数: 5743字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2015.01.023

摘要

为了研究RHDV病毒样粒子作为载体提呈外源B细胞表位的能力，以兔出血症病毒（ RHDV ）衣壳蛋白VP60为载体，构建携带FMDV B细胞表位（ FMDV VP1 B细胞表位200～213 aa ）的VP60嵌合蛋白，研究外源基因对VP60蛋白的表达、病毒样颗粒（ VLPs）的装配及免疫原性的影响。分别在RHDV衣壳蛋白的C端、N端、306和307位氨基酸之间插入外源B细胞表位（ FMDV VP1 B细胞表位200～213 aa ），得到嵌合VP60基因。利用杆状病毒表达系统表达嵌合蛋白，分别命名为VP60-2F、VP60-306F和VP60-578F。经IFA、SDS-PAGE和Western Blot方法鉴定嵌合蛋白的表达，通过电镜观察嵌合蛋白自聚为病毒样颗粒的能力，通过动物试验研究其免疫原性。结果显示，嵌合VP60蛋白在杆状病毒表达系统中得到高效表达，可自聚形成病毒样颗粒，免疫小鼠后可以产生针对VP60和B细胞表位特异的免疫应答。该研究为嵌合VP60 VLPs的形成及结构功能的研究奠定基础，同时为RHDV-VLPs作为外源B细胞表位展示载体的可行性提供依据。