微小RNA-19a对肝细胞LO2脂肪分解代谢的影响

• 作者: 刘秀芬 李伟民 林凤平 田晓玲
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-19 a 过氧化物酶体增殖物激活受体α 脂肪分解代谢
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 481-484
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 2437字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.03.017

摘要

目的：观察微小RNA-19a（microRNA-19a， miR-19a）对肝细胞LO2脂肪分解代谢的影响，并初步探索可能机制。方法：在肝细胞LO2中转染miR-19a模拟物（mimics）或miR-19a抑制物（inhibitor），用实时荧光定量PCR检测miR-19a的水平变化，利用生物信息学网站查找miR-19a的靶点，进而用双萤光素酶报告基因实验验证miR-19a对过氧化物酶体增殖物激活受体α（peroxisome proliferator-activated receptorα，PPARα）3’UTR活性的影响，通过Western blotting法检测PPARα及其下游脂肪分解代谢关键限速酶酰基辅酶A脱氢酶（ acyl-coenzyme a dehy-drogenase，ACADM）和肉毒碱棕榈酰基转移酶1A（carnitine palmitoyltransferase 1A，CPT1A）蛋白水平的变化，通过β-羟丁酸（beta-hydroxybutyric acid，β-OHB）试剂盒检测肝细胞LO2内酮体的生成能力。结果：转染miR-19a mimics可显著升高LO2细胞中的miR-19a水平（P＜0.05），而转染miR-19a inhibitor可明显抑制LO2细胞中的miR-19a水平（P＜0.05）；生物信息学分析提示PPARα可能为miR-19a的潜在靶点，双萤光素酶报告基因实验证实了miR-19a mimics可使PPARα的3’UTR活性明显降低，miR-19a inhibitor可使PPARα的3’ UTR活性显著升高，同时伴随PPARα及其下游基因ACADM和CPT1A的蛋白水平变化。此外，miR-19a mimics明显降低肝细胞LO2中β-OHB的含量（P＜0.05），miR-19a inhibitor可明显上调肝细胞LO2中β-OHB的含量（P＜0.05）。结论： miR-19a可通过调控PPARα及其下游关键限速酶的表达，调节肝细胞的脂肪分解代谢能力。