R-脊椎蛋白1对肝星状细胞活化的作用及其机制

• 作者: 吴晓俊 殷新光 温晓伟 虞玲华 邬万新
• 来源期刊: 中华肝脏病杂志
• 关键词: 肝硬化 肝星状细胞 信号传导 R-脊椎蛋白1
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 肝纤维化
• 页码范围: 166-170
• 页数: 5页
• 字数: 3921字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2015.03.002

摘要

目的 探讨R-脊椎蛋白1(R-Spondin1)在小鼠肝纤维化模型及肝星状细胞(HSC)中的动态表达情况及其对HSC活化的影响. 方法 体内实验:健康雄性昆明种小鼠24只,随机分为2组.模型组(16只):用20％四氯化碳(CCl4)橄榄油5ml/kg皮下注射,2次/周;对照组小鼠(8只)不作任何处理.10周后处死小鼠,留取肝组织,Western blot检测R-Spondin1、α-平滑肌肌动蛋白(c-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(collagen Ⅰ)的蛋白水平,Real-time PCR检测R-Spondinl、α-SMA、collagenⅠ的mRNA水平.体外实验:分离小鼠HSC,检测R-Spondin1、α-SMA、核内β-catenin的蛋白表达情况,以及R-Spondin1的mRNA水平、T淋巴细胞转录因子(TCF)活性在HSC自发激活前后的变化,并比较小鼠HSC经R-Spondin1和抑癌蛋白刺激前后的活化差异.两组间均数比较采用t检验;多组资料采用单因素方差分析,进一步的两两比较采用Dunnett检验. 结果 与对照组相比,肝纤维化模型组R-Spondin1蛋白和mRNA表达水平明显增高,差异有统计学意义(蛋白相对表达量为3.16±0.18与0.99±0.16,t=13.31,P＜0.01;mRNA相对水平为4.36±0.26与0.98±0.12,t=21.46,P＜0.01).在HSC的自发激活过程中,核内β-catenin的蛋白水平和TCF活性显著增强(核内β-catenin蛋白相对表达量为4.47±0.21与0.97±0.14,t=25.25,P＜0.01;TCF相对活性为5.33±0.34与1.03±0.09,t=20.93,P＜0.01);R-Spondin1的蛋白和mRNA表达水平显著上调(蛋白相对表达量为4.54±0.18与1.04±0.12,t=31.17,P＜0.01;mRNA相对水平为5.13±0.15与1.01±0.16,t=38.06,P＜0.01).α-SMA、核内β-catenin的蛋白表达及TCF活性在R-Spondin1刺激后显著上调;而在R-Spondin1和抑癌蛋白共同刺激后无显著变化. 结论 R-Spondin1可能通过增强β-catenin在细胞核内的积聚影响HSC的活化.