MiRNA-24、 miRNA-34 a和miRNA-375抑制小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中Neurod1／BETA2的蛋白表达

• 作者: 张许 朱云霞 韩晓
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: miRNA-24 miRNA-34a miRNA-375 Neurod1 3′非翻译区 胰岛β细胞
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 197-201
• 页数: 5页
• 分类号: Q527+.1
• 字数: 3899字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2015.04.003

摘要

目的：在小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中分析miRNA?24、 miRNA?34a和miRNA?375对Neurod1／BETA2的表达调控以及作用方式。方法设计并合成针对小鼠Neurod1基因3′非翻译区（3′untranslated re?gion，3′UTR）序列的引物，克隆于pMIR?REPORTTM荧光素酶报告基因载体中；用miRanda软件预测可能调控Neurod1表达的miRNAs，挑选在β细胞中有相关功能研究的miRNAs并委托公司合成pre?miRNAs；脂质体法转染至MIN6细胞中，荧光素酶报告基因技术分析这些miRNA对Neurod1的作用；定量RT?PCR分析Neurod1的mRNA水平； Western 印迹检测Neurod1的蛋白表达水平； GSIS检测干扰Neurod1后MIN6细胞的功能。结果成功制备小鼠Neurod1基因的3′UTR荧光素酶报告基因载体；选取了预测在Neurod1的3′UTR有互补结合位点的3个miRNAs （miRNA?24、 miR?34a和miR?375），并挑选一个没有互补结合位点的miRNA （miR?29a）作为阴性对照；在MIN6细胞中过表达pre?miRNA?24、 pre?miR?34a和pre?miR?375能够抑制Neurod1基因3′UTR荧光素酶报告基因的活性，而过表达阴性对照 miRNA?29a则不能抑制其活性；pre?miRNA?24、 pre?miR?34a和pre?miR?375还可以不同程度抑制Neurod1的蛋白表达；在MIN6细胞中干扰Neurod1蛋白表达能够降低细胞的GSIS功能。结论 miRNA?24、 miR?34a和miR?375能够抑制小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中Neurod1的蛋白表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩晓	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	38	125	7.0	10.0
2	张许	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	2	3	1.0	1.0
3	朱云霞	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	15	26	3.0	4.0