重组大肠杆菌表达的Ber e1纯化工艺中去除内毒素效果研究

• 作者: 何颖 刘雪婷 及志恒 李碧舟 肖兰艳 邹泽红 陈惠芳 陶爱林
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 内毒素 巴西坚果2S清蛋白 Triton X-l14萃取 亲和层析 超滤 离子交换层析
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 583-586
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

目的 去除重组巴西坚果过敏原蛋白Ber e 1(rBer e 1)溶液中的内毒素,为后续实验和重组过敏原蛋白的临床应用打下基础.方法 采用亲和层析法、超滤法和离子交换法联合应用以及Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用,比较这两个方案去除重组蛋白溶液中的内毒素效果.结果 亲和层析法、超滤法和离子交换法联合应用的内毒素去除率为99.99％,内毒素浓度为6.25 EU/ml,蛋白回收率为42.8％;Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用的内毒素去除率为99.99％,内毒素浓度为2.09 EU/ml,蛋白回收率为26.1％.结论 Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用蛋白溶液内毒素的去除效果较佳,且内毒素含量以及Triton X-114残留量均在《中国药典》的规定范围内.