哈巴苷对缺氧缺糖诱导下大鼠海马神经细胞游离Ca2+浓度的影响

• 作者: 应夏丽 徐慕蝶 李官泽 肖文喜 钟晓明 黄真
• 来源期刊: 中药材
• 学科: 医学
• 关键词: 哈巴苷 OGD 海马神经细胞 Fho-3/AM负载 荧光分光光度法 Ca2+浓度
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 361-365
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2015.02.038

摘要

目的:研究哈巴苷对缺氧缺糖(OGD)诱导下海马神经细胞内游离Ca2+浓度的影响.方法:原代培养新生24 h内SD乳鼠海马神经细胞,采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色鉴定并检测其纯度;哈巴苷(0.5、1、5、10、25、50、100、150、200、250、500、1 000 μmol/L)预处理48 h后,OGD 4 h,另设正常对照组及模型组,采用MTT法检测各组海马神经细胞活力,筛选哈巴苷有效浓度范围;将SD乳鼠海马神经细胞随机分为正常对照组、模型组、哈巴苷各剂量(50、75、100、125μmol/L)组,采用Fluo-3/AM负载的海马神经细胞,应用荧光倒置显微镜及荧光分光光度计观测哈巴苷各剂量对OGD海马神经细胞内游离Ca2+浓度的影响.结果:原代SD乳鼠海马神经细胞培养至第7天,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色鉴定为海马神经细胞,并检测其神经细胞纯度为85％～ 90％:MTT结果显示:与模型组比较,哈巴苷10、25、50、100 μmol/L能显著增强海马神经细胞的活力(P＜0.05或P＜0.01),确定哈巴苷预处理48 h的有效浓度范围为10～100 μmol/L;荧光倒置显微镜下观察,正常对照组海马神经细胞Ca2+荧光强度弱,模型组海马神经细胞Ca2+荧光强度强;与模型组比较,哈巴苷各剂量预处理48 h,均能降低OGD诱导的海马神经细胞Ca2+的荧光强度,其中75 μmol/L组荧光强度降低最为明显.荧光分光光度法测定显示:与正常对照组比较,模型组海马神经细胞内游离Ca2+浓度显著升高(P＜0.01);与模型组比较,哈巴苷75 μmol/L能显著降低OGD诱导下海马神经细胞内游离Ca2+的浓度(P＜0.05).结论:哈巴苷预保护48 h能降低OGD诱导的海马神经细胞内游离Ca2+的浓度,以75 μmol/L剂量效果最好,其保护作用与降低细胞内游离Ca2+浓度有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄真	浙江中医药大学药学院	98	923	18.0	28.0
2	钟晓明	浙江中医药大学药学院	55	384	11.0	18.0
3	肖文喜	浙江中医药大学药学院	3	4	1.0	2.0
4	徐慕蝶	浙江中医药大学药学院	3	4	1.0	2.0
5	李官泽	浙江中医药大学药学院	2	4	1.0	2.0
6	应夏丽	浙江中医药大学药学院	3	7	2.0	2.0