在宿主细胞内仅有部分慢病毒载体发生了功能性整合

• 作者: 张丽萍 张敬之 檀硕 高越
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒载体 基因治疗 转染 整合
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 187-191
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 字数: 3118字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2015.04.001

摘要

目的：研究慢病毒在感染细胞后，是否全部整合入染色体。方法用慢病毒载体的假病毒感染293 T细胞后，抽提培养2 d和10 d的细胞基因组DNA。通过定量PCR检测细胞基因组中LTR拷贝数，计算出整合率。分别取病毒感染3 d和11 d的细胞，离心重悬后取部分细胞放在荧光显微镜下拍照，在蛋白水平上验证此结论。结果①慢病毒载体在宿主细胞基因组内的平均整合率（47±16）％（n＝10）；②细胞感染慢病毒后3 d和11 d的GFP照片也证实了慢病毒在宿主细胞基因组内部分整合。结论慢病毒载体的假病毒感染293 T细胞后，仅有部分的载体骨架是整合入基因组中的，整合入293 T细胞基因组中的外源基因能够较长时间稳定表达。