补肾活血汤提取物促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖的研究

• 作者: 何敏聪 侯秋科 刘亚梅 张迅超 徐志明 李汪洋 王斌 罗毅文 胡年宏 蔡炎 陈东风 黄永铨
• 来源期刊: 广州中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 补肾活血汤/分离和提纯 骨髓间充质干细胞/病理学 细胞周期 细胞培养
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 中药药理
• 页码范围: 86-91
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 字数: 5639字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2015.01.019

摘要

【目的】筛选出补肾活血汤促进骨髓间充质干细胞增殖的有效部位。【方法】补肾活血汤（全方组）及其拆方（补肾组、活血组）分别用溶剂极性递增法提取得石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇以及水4个部位。骨髓间充质干细胞采用全骨髓贴壁法培养，传至第3代采用表面抗原鉴定，成骨、成脂分化鉴定。将上述补肾活血汤提取物按浓度梯度处理细胞24 h，采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性，筛选出最有效部位及其最佳浓度。用补肾活血汤最有效部位处理细胞， MTT法绘制细胞生长曲线，流式细胞仪检测细胞周期。【结果】与空白对照组比较，补肾活血汤及其拆方均具有不同程度维持细胞活性的作用。其中以补肾组乙酸乙酯部位、全方组乙酸乙酯部位及活血组乙酸乙酯部位最为有效，且呈一定的药物浓度依赖性，100μg/mL为最佳药物浓度，并未出现细胞毒性反应。细胞生长曲线显示：补肾活血汤有效部位处理细胞后，细胞增殖速度与数量较对照组更为明显，以补肾组最有效，全方组次之。流式细胞仪检测细胞周期结果显示：补肾活血汤有效部位处理细胞后，处于增殖期细胞数量明显多于空白对照组，以补肾组最有效，全方组次之。【结论】补肾活血汤促进骨髓间充质干细胞增殖的有效部位在补肾组乙酸乙酯部位，可使骨髓间充质干细胞处于增殖期细胞数目增多。