甘蔗转录激活因子ScCBF1基因的克隆与表达分析

• 作者: 彭磊 徐景升 成伟 程光远 翟玉山 葛丹凤 谭向尧 邓宇晴 郑艳茹
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 甘蔗 CBF结合因子 荧光定量PCR 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种?种质资源?分子遗传学
• 页码范围: 717-724
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2015.00717

摘要

植物在受到低温、高盐、干旱等非生物逆境胁迫后, CBF 结合因子(C-repeat/dehydration-responsive element binding factor)会诱导一系列非生物胁迫应答基因的表达,在提高植物抗逆性方面具有重要作用。本研究利用生物信息学和 RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction)方法从甘蔗中克隆到1个新的 CBF类基因,命名为ScCBF1。该基因的开放读码框(open reading frame, ORF)长度为603 bp,编码200个氨基酸,编码蛋白相对分子质量为22.80 kD,理论等电点为10.31。氨基酸序列比对结果表明, ScCBF1与高粱(Sorghum bicolor)和玉米(Zea mays)中该蛋白相似度分别是96%和94%。进化分析表明ScCBF1与高粱的亲缘关系最近。qRT-PCR表达分析结果表明, ScCBF1在甘蔗根、茎、叶中均有表达,在根中表达量最高。ScCBF1在低温、干旱、脱落酸(ABA)胁迫下诱导表达,而高盐抑制 ScCBF1的表达。成功构建了原核表达载体 pGEX-6P-1-ScCBF1,通过 IPTG 诱导,实现了 ScCBF1蛋白在大肠杆菌中的表达。